Annexin V-EGFP/PI 细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-EGFP Apoptosis Detection Kit)是用EGFP 融合的
Annexin V 作为探针,来检测细胞凋亡。可用荧光显微镜、流式细胞仪或其它荧光检测设备进行检测。
检测原理为:在正常的活细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36KD 的钙离子依赖性磷脂结合蛋白,能与PS 高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。
碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI 是一种核酸染料,它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此,将Annexin V 与PI 联合使用时,PI 则被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被EGFP 和PI 结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。
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