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小鼠CD8阳性T细胞 | Mouse CD8+T cells
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  • 货号 LV-CD8+T002
  • 品牌 立沃生物
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小鼠CD8阳性T细胞

Mouse CD8+ T cells

(仅用于科学研究)

小鼠CD8阳性T细胞是从小鼠全血中通过Ficoll分离得到PBMC,再经过美天旎抗CD8磁珠纯化,最后经过抗CD8抗体进行流式分析,细胞纯度不低于90%。

I 试剂与材料

-冻存小鼠CD8阳性T细胞(Cat# LV-CD8+T002)

-培养基(完全RPMI1640,见下表)

-37℃恒温水浴锅

-生物安全柜

-15ml离心管

-37℃/5%二氧化碳培养箱

-宽口滴管和宽口移液枪头

-移液枪

-75%酒精

II 完全RPMI1640培养基

成分

用量

不完全RPMI1640溶液

500ml

左旋谷氨酰胺(L-Glu

2mM

2-巯基乙醇(2-ME

50μM

青霉素(Penicillin)

100μg/ml

链霉素(Streptomycin)

100μg/ml

FCS(56℃灭活30min)

50ml

 

III 细胞的复苏与铺板

1.       完全RPMI1640培养基放入37℃恒温水浴锅中让其充分预热。

2.       将冻存的细胞从冷藏位置迅速转移至37℃恒温水浴

3.       锅中。尽可能多的浸入37℃水中,作规律的水平摇动,但必须确保冻存管盖子保持在水面以上。

4.       解冻冻存管至刚好完全溶解成液体,约90-120秒,。

5.       用75%酒精对冻存管消毒,并将其转移到生物安全柜中。

6.       小心地将解冻后的细胞吸出,移至15ml离心管,并

 

用培养基润洗一遍冻存管及吸取细胞的枪头。

7.       一边摇晃离心管,一边加入完全RPMI1640培养基至12ml(注意:前3ml要缓慢逐滴加入并摇晃,后面9ml可加快速度),最后上下颠倒混匀。

8.       20℃,500×g,升速7,降速4,离心8min。

9.       弃上清,加入3ml完全RPMI1640培养基重悬细胞,并用台盼蓝染色计数。

10.   重复第7步,用完全RPMI1640培养基重悬细胞,并按实验要求的密度铺板进行铺板。

11.   在37℃/ 5%二氧化碳培养箱中培养。

联系方式

公司电话:0755-28284050

技术支持:19902901483(周博士
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