人CD19阳性B细胞

Human CD19+ B cells

(仅用于科学研究)

人CD19阳性B细胞是从人全血中通过Ficoll分离得到PBMC，再经过美天旎抗CD19磁珠纯化，最后经过抗CD19抗体进行流式分析，细胞纯度不低于95%。

I 试剂与材料

-冻存人CD19阳性B细胞（Cat# LV-Bcell001/002）

-培养基（完全RPMI1640，见下表）

-37℃恒温水浴锅

-生物安全柜

-15ml离心管

-37℃/5%二氧化碳培养箱

-宽口滴管和宽口移液枪头

-移液枪

-75%酒精

II 完全RPMI1640培养基

III 细胞的复苏与铺板

1.       完全RPMI1640培养基放入37℃恒温水浴锅中让其充分预热。

2.       将冻存的细胞从冷藏位置迅速转移至37℃恒温水浴锅中。尽可能多的浸入37℃水中，作规律的水平摇动，但必须确保冻存管盖子保持在水面以上。

3.       解冻冻存管至刚好完全溶解成液体，约60-120秒，。

4.       用75%酒精对冻存管消毒，并将其转移到生物安全柜。

5.       小心地将解冻后的细胞吸出，移至15ml离心管，并用培养基润洗一遍冻存管及吸取细胞的枪头。

6.       一边摇晃离心管，一边加入完全RPMI1640培养基至12ml（注意：前3ml要缓慢逐滴加入并摇晃，后

面9ml可加快速度），最后上下颠倒混匀。

7.       20℃，500xg，升速7，降速4，离心8min。

8.       弃上清，加入3ml完全RPMI1640培养基重悬细胞，并用台盼蓝染色计数。

9.       重复第7步，用完全RPMI1640培养基重悬细胞，并按实验要求的密度铺板进行铺板。

10.   在37℃/ 5%二氧化碳培养箱中培养。

IV 关于售后

如您发现有产品任何质量问题，请您收集原始数据，请第一时间联系公司销售或者技术支持，公司安排人员保证售后。每个实验室条件不同，操作人员习惯不同，熟练程度不一样，实验失败存在客观因素。如未严格按照说明书操作、超过售后时限，公司不做售后，请老师理解与支持。

售后有效期与提供的原始数据：

复苏问题：复苏24小时以内；提供台盼蓝染色或者PI染色。

污染问题：复苏96小时以内；提供相差显微镜照片。

纯度问题：一个月内；提供免疫荧光或者流式结果。

V 联系电话

公司电话：0755-28284050

技术支持：19902901483（周博士）